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    標準的PCR實驗室設計規范

    發布日期:2020-06-11  點擊次數:

    關鍵詞:超微量分光光度計;核酸提取儀;PCR;美析儀器www.hzcaibao.com;UL-1000

       PCR即聚合酶鏈式反應,是分子生物學研究和實驗的常規方法,也是生物學、醫學臨床等領域廣泛應用的實驗技術。其特點是能將微量的 DNA 大幅增加。實驗室分為四個區域,進入各工作區域必須嚴格按照單一方向進行,不同的工作區域使用不同的工作服(例如不同的顏色)。工作人員離開各工作區域時,不得將工作服帶出,四區域分別為:
    1.試劑配制區
    2.樣品處理區
    3.核酸擴增區
    4.產物分析區



     PCR 實驗室可以是分散形式,也可以是組合形式。完成一組 PCR 實驗,通常應經過試劑配制、樣品處理、核酸擴增及產物分析四個實驗過程,若實驗工藝需要,還應增加樣品粉碎過程。

    一、分散形式 PCR 實驗室
       所謂分散形式 PCR 實驗室,是指完成上述實驗過程的實驗用房彼此相距較遠,呈分散布置形式。對于這種布置形式的 PCR 實驗室,由于各個實驗之間不易相互干擾,因此無需特殊條件要求。
    二、組合形式 PCR 實驗室
       所謂組合形式 PCR 實驗室, 是指完成 PCR 四個實驗過程的實驗用房相鄰布置,組成獨立實驗區域的形式。對于組合形式 PCR 實驗室,由于各個實驗間集中布置,容易造成相互干擾,因此,對總體布局以及屏障系統具有一定的要求。各室在入口處設緩沖間,以減少室內外空氣交換。試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓,以防外界含核酸氣溶膠的空氣進入,造成污染;核酸擴增室及產物分析室應呈微負壓,以防含核酸的氣溶膠擴散出去污染試劑與樣品。
    如果使用熒光 PCR 儀,擴增室和產物分析室可以合并。
      若房間進深允許,可設 PCR 內部專用走廊。需要指出的是在減少室內外空氣交換方面,緩沖間比專用走廊更有意義。
     

       各個區域之間應具備單向的實驗工藝流、物流、人流與氣流,形成單向流程的保護屏障,避免實驗之間的相互干擾,防止核酸氣溶膠對實驗過程造成污染產生假性結果。
       PCR實驗室的空氣流向必須嚴格按照試劑儲存和準備區標本制備區擴增區擴增產物分析區空氣壓力逐漸遞減方式進行,防止擴增產物順空氣氣流進入擴增前的區域。需要嚴格的通風設計,若通風設計不合理,會使風速流向混亂,甚至危害人們健康。
     

    進入實驗室區域工作人員應該按照以下路徑:
    公共清潔區——更衣間(更換潔凈服)——緩沖間——污染實驗區
    工作人員退出實驗室的路徑為:
    污染試驗區——緩沖間——淋浴間(有條件的可設置)——更衣間——公共清潔區

      標準的PCR實驗室設計規范
      1、主體結構
       主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內所有陰角、陽角均采用鋁合金 50 內圓角鋁,從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題。結構牢固,線條簡明,美觀大方,密封性好。
     2、標準的三區分隔和氣壓調節
       將 PCR 過程分成試劑準備、標本制備和 PCR 擴增檢測三個獨立的實驗區。整個區域有一個整體緩沖走廊。每個獨立實驗區設置有緩沖區, 同時各區通過氣壓調節,使整個 PCR 實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染并降低擴增產物對人員和環境的污染。
      可打開緩沖區Ⅰ,緩沖區Ⅱ和 PCR 擴增區的排風扇往外排氣,在實驗區的外墻上和各扇門上都安裝有風量可調的回風口,空氣通過回風口向室內換氣。
    3、消毒
       在三個實驗區和三個緩沖區頂部以及傳送窗內部安裝有紫外燈,供消毒用。
      在試劑準備區和標本制備區 還設置移動紫外線燈,對實驗桌進行局部消毒。
    4、機械連鎖不銹鋼傳遞窗
       試劑和標本通過機械連鎖不銹鋼(不建議使用電子連鎖方式)傳遞窗傳遞,保證試劑和標本在傳遞過程中不受污染(人物分流)。
    5、地面
       地面建議使用 PVC 卷材地面或自流坪地面,整體性好。便于進行清掃,耐腐蝕。沒有條件的也可采用水磨石地面,或大塊的瓷磚(至少 800mm×800mm)接縫需要小于 2mm。
    6、照明
       燈具要選用凈化燈具,能達到便于清洗、不積塵的特點。

    在建設的過程中應注意:

    ●規范的安裝流程和全面的服務流程。

    ●嚴格按照規范科學設計的安裝流程。
    ●安裝前需要確定以下安裝條件,如:電源電壓,電源進線位置,電話網絡線進線位置,進水水壓,最小安裝空間,地面平整度,通風孔、進水管和下水管的位置等,理想狀態的空間尺寸和通風口尺寸。

    ●實驗室的墻體,包括頂棚,應結構牢固、氣密性好;所有陰角宜采用圓弧形線條過渡;墻體內壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒;地面材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。

    關鍵詞:超微量分光光度計;核酸提取儀;PCR;美析儀器www.hzcaibao.com;UL-1000

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